1 病毒包装

慢病毒（Lentivirus，LV）是由人类免疫缺陷病毒（HIV）改造而来的一种病毒载体，属于逆转录病毒。慢病毒可将特定基因片段随机、稳定地整合到宿主细胞的基因组中，实现目的基因的持续稳定的表达目的产物，因此，目前慢病毒载体已经广泛地应用于基因的表达调控如过表达，干扰和基因敲除。

腺相关病毒（Adeno-associated virus, AAV）由直径约26nm的二十面体蛋白质衣壳和约4.7 kb的单链DNA基因组组成。主要以游离于染色体的附加形式存在，并可长期存在于非分裂期的细胞中。由于具有高组织特异性、低免疫原性、良好的扩散性、高安全性以及宿主范围广等特点，AAV特别适用于体内的研究，且已成为基因治疗领域中最具前景的病毒载体之一。

腺病毒（Adenovirus, Adv）是一种直径约为90-100nm的无包膜病毒，具有广泛的细胞和组织感染能力，且腺病毒载体携带基因片段的容量大，能达到7-8kb的容量。腺病毒包装系统包含1个表达质粒和1到多个辅助质粒，目的基因游离于宿主细胞基因组独立表达，可实现目的产物快速、高丰度的表达，同时避免因基因整合而产生的基因突变现象。

整合酶缺陷型慢病毒（Integrase-deficient lentivirus，简称IDLV），也称为非整合型慢病毒（Non-integrating lentivirus，简称NILV），是一种源自传统慢病毒的新技术。IDLV的整合功能缺失是由整合酶蛋白中的点突变导致的。整合酶没有了功能，原病毒DNA就不能插入细胞基因组，而是作为游离体存在于细胞核中。随着细胞分裂，原病毒DNA被逐渐稀释并丢失。与传统慢病毒相比，IDLV降低了插入诱变的风险，适用于CRISPR基因编辑、iPS干细胞等。

服务流程

（1）根据客户需求，制定实验方案。

（2）载体构建（提供载体酶切测序报告）。

（3）病毒包装。

（4）检测病毒滴度。

（5）成品交付。

2 病毒纯化

为了了解病毒的结构、传染与免疫、遗传与变异等性质，常常需要高纯度的病毒。病毒培养液中含有大量杂质，包括缺损颗粒、病毒外壳、细胞毒素、培养基、血清以及细胞碎片等，这些杂质若被注入动物体内，会引起宿主强烈的免疫反应。纯化有利于病毒悬浮于体内注射的缓冲液中。病毒纯化的原则：以保持病毒的生物活性和感染性为前提，去除非病毒杂质，提取出高纯度的病毒。

服务流程

（1）根据客户需求，制定实验方案。

（2）释放病毒到胞外。

（3）去除细胞碎块。

（4）病毒悬液浓缩。

3 病毒感染

病毒感染细胞实验可以用于：

（1）将目的基因整合到大多数真核细胞。

（2）将目的基因包装成病毒来感染细胞，从而得到表达满足实验需求。

服务流程

（1）根据客户需求，制定实验方案。

（2）细胞培养至目标状态。

（3）细胞中加入病毒进行感染。

（4）孵育细胞。

（5）对感染后细胞进行检测。

4 基因编辑技术

基因编辑是指对目标基因进行删除、替换、插入等操作，以获得新的功能或表型，甚至创造新的物种。作为生命科学发展迅速的重要研究领域，基因编辑技术的开发及应用使得生物体的遗传改造进入了前所未有的深度与广度，为解析特定基因的功能立下了汗马功劳。文章对当前基因编辑相关技术，及我国在基因编辑领域存在的挑战及机遇进行概述，以增进对该技术体系的整体认知，帮助更好地寻找该领域新的突破点。目前常见的基因编辑技术包括：重组核酸酶介导的基因编辑技术、RNA引导的基因编辑技术（CRISPR/Cas9技术）、DNA介导的基因编辑工具。脂质体细胞转基因方法是最常用的方法之一。

服务流程

（1）根据客户需求，制定实验方案。

（2）根据实验方案进行实验。

（3）数据统计及结果分析。

5 Western blot

蛋白免疫印迹（Western Blot）是将组织或细胞总蛋白质经电泳分离后转移到NC膜或PVDF膜上，然后利用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白检测技术，已广泛应用于蛋白表达检测、抗体活性检测及疾病早期诊断等多个领域。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。

服务流程

（1）根据客户需求，制定实验方案以及取样要求。

（2）接收样品，对样品进行预处理并测定蛋白浓度。

（3）根据蛋白浓度上样——SDS-PAGE电泳——转膜——封闭和抗体孵育——图像采集。

（4）结果统计分析。

6 免疫共沉淀

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在argarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白，那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离，对B蛋白进行检测，进而证明两者间的相互作用。

服务流程

（1）根据客户需求，制定实验方案以及取样要求。

（2）接收样品及抗体，并对样品进行预处理。

（3）抗体与蛋白裂解液的蛋白结合后，与蛋白A/G（ProteinA/G）或二抗偶联的agaose或Sepharose珠子孵育。

（4）通过离心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物。

（5）在高温及还原剂的作用下，抗原与抗体解离，离心收集上清，上清中包括抗体、目的蛋白和少量的杂蛋白。

7 Elisa

酶联免疫吸附实验（ELISA）即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。

服务流程

（1）根据客户需求，制定实验方案和取样要求。

（2）接收样品。

（3）对样品进行预处理，并配制标准品。

（4）双抗夹心法

（6）加终止液，450 nm读数。

（7）结果统计及分析。