病理学研究
1 石蜡包埋
石蜡包埋是对组织或者细胞进行固定的常见方法,在病理学研究中有着重要作用。
活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。新鲜组织经过固定取材脱水透明浸蜡后用特定的包埋模具将前期处理的组织块与融化的石蜡一起包埋成组织蜡块的过程称为组织取材包埋。细胞沉淀经过琼脂预包埋之后再进行脱水石蜡包埋。
服务流程
(1)根据客户需求制定实验方案和取样要求
(2)接收样品,梯度脱水
(3)透明。
(4)浸蜡。
(5)包埋
2 石蜡切片
石蜡切片(paraffin section)组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤,进而能清晰辨认其形态结构。
业务流程
(1)根据客户需求制定实验方案和取样要求
(2)接收样品,包埋
(3)按照位置要求进行切片。
(4)展片。
(5)烤片。
(6)储存切片。
3 冰冻切片
冰冻切片(frozen section)是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,且不经过酒精、二甲苯等有机溶解以及高温环境。可较好的保存脂类,酶类等易于溶解有机溶剂的物质。
业务流程
(1)根据客户需求,制定实验方案和样品要求。
(2)OCT包埋。
(3)按指定要求切片。
(4)切片储存。
4 免疫组化
免疫组化是指通过组织切片或细胞片中的抗原与一抗结合反应,再通过经辣根过氧化物酶(HRP)多聚物标记过的二抗与一抗结合反应,最后辣根过氧化物酶与DAB显色反应,组织细胞片在光学显微镜下可清晰看见棕黄色的颗粒沉淀物,从而达到观察分析抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)在组织细胞水平上的表达情况(有、无)及表达定位(细胞核、细胞浆、细胞膜、间质)和半定量分析(无、弱、强、非常强)。
业务流程
(1)根据客户需求,制定实验方案和样品要求。
(2)接收样品,石蜡切片脱蜡至水。
(3)抗原修复。
(4)3%的双氧水处理。
(5)画圈,血清封闭。
(6)一抗4℃过夜孵育
(7)二抗室温孵育
(8)显色。
(9)苏木素染核。
(10)脱水、透明、封片。
(11)拍照并进行分析。
5 免疫荧光
免疫荧光是指通过一抗与组织胞片中的抗原结合反应,再利用对应的荧光标记的二抗与一抗体进行免疫结合反应,最终通过荧光显微镜或共聚焦显微镜观察,达到分析组织细胞水平抗原表达情况、表达定位和定量分析。
业务流程
(1)根据客户需求,制定实验方案和样品要求。
(2)接收样品,切片脱蜡至水。
(3)抗原修复。
(4)3%的双氧水处理。
(5)画圈,血清封闭。
(5)一抗孵育
(6)二抗孵育
(7)DAPI复染细胞核:。
(8)自发荧光淬灭。
(9)封片。
(10)拍照并进行分析。
6 HE染色
苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining ),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
业务流程
(1)根据客户需求,制定实验方案和送样要求。
(2)接收样品,切片脱蜡至水。
(3)苏木素染色。
(4)伊红染色。
(5)脱水、透明、封片。
(6)拍照并进行分析。
7 番红-固绿染色
关节软骨为覆盖关节面的海绵状透明软骨,除少量细胞外,具有丰富的细胞外基质(主要成分为胶原纤维、蛋白聚糖和水等)。番红O-固绿染色可直观反映关节软骨、软骨下的骨组织结构,软骨呈红色,成骨呈绿色,对比鲜明,区分清晰,在关节软骨及软骨下骨的形态学研究中备受青睐。
业务流程
(1)根据客户需求,制定实验方案和送样要求。
(2)接收样品,切片脱蜡至水。
(3)固绿染色。
(4)番红O染色。
(5)脱水、透明、封片。
(6)拍照并进行分析。